Science技术新突破 观测病毒内部

生物通报道自从显微镜被发现以来，科学家们一直致力于改进这一技术用于显示更小的细胞结构以深入了解人类细胞、细菌和病毒的内部机制。如今来自国立卫生研究员(NIH)下属关节炎、肌肉骨骼肌皮肤疾病国家研究院(NIAMS)的研究人员开发了一种新技术可清楚观察到病毒内的结构。他们在一期(1月13日)的《科学》(Science)杂志上报道了这一成果。生物通www.ebiotrade.com获取：Bio-RadChemiDocMP多色荧光成像系统资料低温电子显微镜(cryo-EM)技术是一种...

华大基因、墨尔本大学Nature Genetics新文章

摘要：生物通www.ebiotrade.com1月15日，来自澳大利亚墨尔本大学、华大基因等处的研究人员联合在《自然遗传学》(NatureGenetics)发表了题为“Whole-genomesequenceofSchistosomahaematobium”的研究论文，报告了对埃及血吸虫(Schistosomahaematobium)全基因组测序的研究成果。索取：Millipore抑制剂技术手册生物通www.ebiotrade.com生物通报道1月15日，来自澳大利亚墨尔本大...

测序解析光合作用背后的机制

摘要：生物通www.ebiotrade.com在近日召开的植物和动物基因组大会上，孟山都基因组分析中心的研究人员ToddMichael介绍了他们如何利用IonPGM测序仪对玉米石(又名白花景天)这种植物的基因组进行测序。在干旱条件下，这种植物可从标准的C3光合作用转换到景天酸代谢(CAM)。索取：IonPGM测序资料生物通www.ebiotrade.com生物通报道在近日召开的植物和动物基因组大会上，孟山都基因组分析中心的研究人员ToddMichael介绍了他们如何利用Ion...

抗甲状腺球蛋白抗体检测方法临床意义

过去用于检测Tg自身抗体的方法有：沉淀试验、间接免疫荧光(11F)、血凝试验、ELISA和放射定量分析。目前常用IIF法和ELISA法。IIF法荧光图形为在甲状腺滤泡腔内出现波浪状着染。在甲状腺炎患者中抗TPO抗体检测方法的灵敏度稍逊于抗Tg抗体，但实际上两者的检出率不相上下。用高灵敏度方法检测Tg，可能会降低与疾病相关的特异性。一些评估Tg自身抗体特异性的研究表明，甲状腺功能正常的个体与自身免疫性甲状腺炎免疫应答之间存有一定的差别。正常人亦可产生能识别相同或具有交叉反应性抗...

抗体标记直接法和间接法的选用

很多免疫学技术依赖于标记抗体的使用。对抗体进行标记主要是用于抗原的定位分析，在某些情况下，也可以对混杂有大量其他分子的样本中的抗原进行定量检测。由于抗体与其相应抗原具有很高的亲和力，因此带有易识别标记物的抗体可以定位分析抗原，并且是一种理想的快速价廉的定量测定方法。需要使用标记抗体的三种方法，即免疫染色法、免疫印迹法和免疫分析。此三种方法均能定位复杂混合物中的抗原，而且通过适当的对照也能定量测定。就免疫染色法而言，其目的就是定位正常细胞环境中出现的抗原。在此背景下，所有抗原均...

凝胶电泳前的蛋白质烷化

1．如果使用经免疫沉淀法得到的蛋白，按常规洗涤免疫复合物。尽可能*去除zui后的洗液。如果使用其他来源的蛋白，则将其转入20mmol／L的磷酸盐溶液中(pH7．0)，或直接在20／1l水中重悬蛋白。蛋白浓度应低于lmg／m1。2．加入20u1．5％SDS和20mmol／LDTI。3．加热至85C10min，仔细将上清液移入另一试管。4．加入10rd新鲜配制的0．2mmol／LN-乙基顺了烯二酰亚胺(NEM)，12．5mg／m1的水溶液为饱和溶液)，使用前临时配制。85℃温育1...

用多聚甲醛固定悬浮细胞

所有的固定方案必须做到：①防止抗原丢失；②透化细胞以便使抗体进入；③尽量使抗原保持能与抗体结合的状态；④维持细胞正常结构。常用的固定剂种类很多，固定剂的正确选择取决于被研究抗原的性质及所用抗体的特性。固定剂可分为两大类：有机溶剂和交联剂。有机溶剂如乙醇和丙酮能够去除脂类物质使细胞脱水，把蛋白质沉淀在细胞结构上。交联剂一般通过自由氨基基团把生物分子桥连起来，形成一个相互连接的抗原网。两种方法均使蛋白质抗原部分变性。因此，在细胞染色中，能够识别变性蛋白的抗体更加有用。在某些情况下...

免疫亲和纯化的操作步骤

1．主要内容纯化率为1000～10000倍。快速纯化抗原，层析柱常可重复使用。可获得纯化的抗原。不能用于定量测定。纯化效果取决于抗原的浓度和抗体的亲和力需要适当纯化的抗体。2．操作步骤(1)将抗体结合到蛋白A或蛋白G微珠上。对于一般用途的层析柱，每毫升湿的微珠大约可以结合2mg单克隆抗体或亲和纯化的多克隆抗体。将抗体和蛋白A或蛋白G微珠混合制成稀薄的匀浆，在总量为10ml的溶液中加入大约lml微珠，室温孵育1h，轻轻摇动混匀。(2)用10倍体积的0．2mol／L硼酸钠(pH9...