First Strand cDNA Synthesis Kit

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SD37-5G：具有 gDNA 消除功能的 5G First Strand cDNA Synthesis Kit
具有 gDNA 消除功能的 5G 一链 cDNA 合成试剂盒为 RNA 样品中的逆转录和基因组 DNA 消除提供了快速高效的程序。为了在 RT-PCR 和 RT-qPCR 中获得准确的结果，仅扩增和检测 cDNA 非常重要。通过设计跨越外显子/外显子边界的引物或探针，可以避免基因组 DNA 的干扰。然而，在不可能的情况下（例如，cDNA 来自单外显子基因，或者基因组 DNA 序列中存在经过加工的假基因），起始 RNA 样品必须不含基因组 DNA。具有 gDNA 消除功能的 5G 一链 cDNA 合成试剂盒将 RNA 样品的基因组 DNA 消除和第一链 cDNA 合成结合在一个简单的工作流程中，以确保 RT-PCR 和 RT-qPCR 结果的准确性。由于无需进行单独的 DNase 消化并重新纯化 RNA 样品，因此可以节省您的时间和成本。
具有gDNA消除功能的5G第一链cDNA合成试剂盒是具有gDNA消除功能的4G第一链cDNA合成试剂盒的升级版本。它包括新一代逆转录酶，5G逆转录酶，适合逆转录优化。缓冲液进一步提高了单链合成的效率。该试剂盒中的5×gDNA去除缓冲液可在42°C 2 min下快速去除基因组DNA污染，确保后续结果更可靠，并简化qPCR引物设计，无需设计跨内含子的引物。该试剂盒包含单组分逆转录引物 Oligo (dT)20 VN 和随机六聚体。用户可以根据需要灵活选择反转录引物进行后续实验。该试剂盒可以合成全长cDNA（长达20 kb）用于克隆等下游实验，还可以合成高度均一的cDNA用于qPCR定量。

具有gDNA消除功能的5G一链cDNA合成试剂盒特点：

具有 gDNA 消除功能的 5G First Strand cDNA Synthesis Kit的特点：
* 更高的逆转录效率和 RNA 转录本所有区域的 cDNA 产量更高：基于更高效的 5G 逆转录酶。
* 引物灵活选择：针对不同的实验设计，可以灵活使用不同类型的反转录引物。
* 通过5×gDNA Removing Buffer快速去除基因组污染：确保后续结果更可靠，并简化qPCR引物设计，无需跨内含子设计引物。

成分
gDNA 去除缓冲液 (5X)：用于有效消除 RNA 样品中基因组 DNA 污染的缓冲液
RT 缓冲液 (10X)：针对反转录优化的缓冲液；含有 MgCl2、dNTP 和稳定剂
5G 酶混合物：逆转录酶和 RNase 抑制剂的混合物。
Oligo (dT)20 VN 底漆。
随机六聚体。
无 RNase H2O：超纯品质。

储存试剂盒在冷冻恒温冰箱中储存可稳定一年。解冻后，使用前将各成分充分混合。不建议频繁冷冻和解冻。

SD37-4G：具有 gDNA 消除功能的 4G First Strand cDNA Synthesis Kit
具有gDNA消除功能的4G第一链cDNA合成试剂盒包含新一代逆转录酶4G Reverse Transcriptase，适合逆转录优化。 4G逆转录酶是在M-MLV（RNase H-）逆转录酶的基础上，通过体外分子进化技术获得的新型逆转录酶。与上一代逆转录酶相比，4G逆转录酶的热稳定性进一步大幅提升，非常适合二级结构复杂的RNA模板的逆转录。 4G逆转录酶具有多个点突变，进一步增强模板亲和力和进展，对常见逆转录抑制剂具有更高的耐受性，从而大大提高了合成全长cDNA的能力。
具有gDNA消除功能的4G第一链cDNA合成试剂盒包含合成所需的所有成分。产品适用于后续PCR、qPCR等实验。 2 × RT Mix 包含优化的缓冲系统和 dNTP； 4G 酶混合物含有 4G 逆转录酶和 RNase 抑制剂。试剂盒中包含的Oligo (dT)23 VN对Poly A+ mRNA的锚定能力比Oligo (dT)18更强，使得逆转录效率更高。用户可以根据需要选择Oligo (dT)23 VN、随机六聚体或基因特异性引物作为反转录引物。后续灵活可选的操作步骤不仅可以合成全长cDNA（长达20kb）进行克隆，还可以高效合成 cDNA，qPCR 每个位置的逆转录效率均一致。

具有gDNA消除功能的4G一链cDNA合成试剂盒特点：
* 基于高效4G反转录酶，耐温性保证了RNA复杂的二级结构可以在高温条件下打开，获得更长的cDNA。
* 模板起始量范围广泛：从 1 pg - 5 μg 总 RNA。
* 长片段扩增：长达15 kb或以上。
* Anchored Oligo (dT)23 VN 引物专为高特异性结合位点锚定而设计，确保第一链 cDNA 合成的效率和成功率。
* 针对不同的下游应用选择不同的底漆。合成的单链cDNA广泛应用于分子克隆、杂交、PCR扩增和qPCR反应等。

成分：
gDNA 去除缓冲液 (5X)：用于有效消除 RNA 样品中基因组 DNA 污染的缓冲液
RT 缓冲液 (2X)：针对反转录优化的缓冲液；含有 MgCl2、dNTP 和稳定剂
4G 酶混合物：逆转录酶和 RNase 抑制剂的混合物。
Oligo (dT)20 VN 底漆。
随机六聚体。
无 RNase H2O：超纯品质。

反转录指南：
* 高质量 RNA 对于高质量 cDNA 合成至关重要。
* 所有反应均在冰上进行，以尽量减少 RNA 降解的风险。
* 逆转录后，必须在 95°C 下孵育 3 分钟来灭活反应。
* 该套件中提供底漆。如果应使用基因特异性引物（未提供），我们建议使用终浓度 0.7 uM，并且可以进行 0.5 uM 至 1 uM 的引物滴定。
* 对于两步 RT-qPCR，添加的 cDNA 体积（来自未稀释的 RT 反应）不应超过最终 PCR 体积的 1/10。

质量控制： First Strand cDNA Synthesis Kit成分不含污染的 DNase 和 RNase。该试剂盒使用实时 RT-PCR 和 SYBR Green qPCR Master Mix 进行功能测试，用于扩增源自人类通用 RNA 的 GAPDH cDNA。

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