猪肿瘤坏死因子α（TNF-α）定量检测试剂盒（ELISA）

【试剂盒名称】
猪肿瘤坏死因子α（TNF-α）定量检测试剂盒（ELISA）
【试剂盒用途】
定量检测猪血清、血浆及相关液体样本中肿瘤坏死因子α（TNF-α）的含量。
【检测原理】
本试剂盒采用双抗体两步夹心酶联免疫吸附法（ELISA）。将标准品、待测样本加入到预
先包被猪肿瘤坏死因子α（TNF-α）单克隆抗体透明酶标包被板中，温育足够时间后，洗涤除
去未结合的成分，再加入酶标工作液，温育足够时间后，洗涤除去未结合的成分。依次加入
底物A、B，底物（TMB）在辣根过氧化物酶（HRP）催化下转化为蓝色产物，在酸的作用
下变成黄色，颜色的深浅与样品中猪肿瘤坏死因子α（TNF-α）浓度呈正相关，450nm 波长下
测定OD 值，根据标准品和样品的OD 值，计算样本中猪肿瘤坏死因子α（TNF-α）含量。
【试剂盒组成】
备注：标准品（1 号→6 号）浓度依次为：200、100、50、25、12.5、6.25 ng/L.
【需要而未提供的试剂和器材】
1、37℃恒温箱
2、标准规格酶标仪
3、精密移液器及一次性吸头
4、蒸馏水
5、一次性试管
6、吸水纸
【操作步骤】
1、准备：从冰箱取出试剂盒，室温复温平衡30 分钟。
2、配液：用蒸馏水将20 倍浓缩洗涤液稀释成原倍的洗涤液。
3、加标准品和待测样本：取足够数量的酶标包被板，固定于框架上，分别设置标准品孔、
待测样本孔和空白对照孔，记录各孔位置，在标准品孔中加入标准品50μL；待测样本孔中先
1 酶标包被板12 孔×8 条7 显色剂A 液6mL
2 标准品0.3mL×6 管8 显色剂B 液6mL
3 20 倍浓缩洗涤液25mL 9 终止液6mL
4 样本稀释液6mL 10 说明书1 份
5 特殊稀释液6mL 11 封板膜2 张
6 酶标试剂6mL 12 密封袋1 个