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单克隆抗体与同聚体抗原的双价结合增加亲合性

更新时间:2012-02-10点击次数:3926

亲合性(avidity)是测定抗体和抗原复合物的整体稳定性。抗体—抗原相互作用的整体强度受3个主要因素控制:抗体对表位的内在亲和力、抗体和抗原的结合价以及参与反应成分的立体结构。因为亲合性是指整个反应,故可从根本上决定所用免疫化学技术的成败。

 
    当抗体和抗原形成多价复合物时相互作用的强度显著增加
    大多数免疫化学步骤包括多价相互作用。所有抗体都是多价的;IgG和大多数IgA为2价,IgM为10价。抗原可以是多价的,因其含有相同表位的多个拷贝,例如:各种同聚物,或者因为存在可被不同抗体识别的众多表位。多价相互作用可以显著地稳定免疫复合物,致使反应实际上是不可逆的。
    多聚性相互作用甚至可以使低亲和力抗体牢固地结合。由于一些方法很可能是多价的相互作用,所以低亲和力抗体在一种方法中可能性能良好,但不适用于另一种方法。当抗体在不同方法中显示这种差别时,经常是由于在多价结合中的差异造成的。同样地,在一种方法中不可测的交叉反应可能干扰其他方法分析的结果。
    预测多价的影响通常并不容易,因为反应包括分子的几何状排列产生的空间压缩。然而,多价的影响通过下述的几个简单例子来说明:①单克隆抗体与同聚体抗原的相互作用;②多克隆抗体与有多个表位的抗原结合产生大量多聚性复合物;③多克隆抗体与有多个表位的抗原结合形成第二抗体与多聚性结合的靶位;④抗体和固定在固相载体上的抗原结合。这些模式虽在某些方面有差别,但是具有上述例子的基本特征。
单克隆抗体与同聚体抗原的双价结合增加亲合性
 
    同聚体的抗原存在相同的重复表位,促进双价结合
    当单克隆抗体和多聚性抗原结合时,开始的反应是与前面讨论的双分子相互作用相同,抗体通过扩散遇到抗原。然而,反应的第二步是抗体的游离结合位点和保留相同抗原分子上的同样位点相结合。这个反应是发生在分子内的转换并不依靠扩散作用。它仅受到构象的限制。这种分子复合物一旦构成,单一的抗体—表位相互作用的解离率与一般双分子复合物相似。然而,  由于抗原通过另一些相互作用将仍会与之结合时,观察到的解离将十分缓慢,因此形成非常稳定的抗体—抗原复合物。
    这种类型的多聚性相互作用在所有免疫化学中都可能发生。
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